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mokk1112

木虫 (小有名气)

[交流] 动物组织RNA抽提

前段时间做了高通量测序,因为送测序的缘故动物组织样品是保存Trizol中,目前要做验证,抽提RNA遇到了问题。
   我是直接在Trizol保存的组织中加钢珠低温研磨,然后按照正常Trizol法抽提,最后RNA量挺高,但是电泳检测发现RNA都降解成碎片,分不出28s,18s,5s
RNA,而按照同样方法抽提的细胞RNA(不用研磨)。求问可能是什么缘故,保存在Trizol中的组织该如何抽提RNA???求助
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生命是团酵母
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wusofa

金虫 (小有名气)

蛋白RNA相互作用研究


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉你在抽提之前RNA就已经降解了。
由于你冻的是团块,可能trizol根本渗透不到团块内部,没有对RNA起保护作用。
建议新鲜组织研磨好后再加trizol裂解冻存。
当然直接抽提最好!
2楼2017-06-07 14:45:35
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3楼2017-06-07 14:58:40
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不知道菜虫

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般是保存的样品在液氮环境下研磨组织样品,然后加tirzol在冰上抽提

发自小木虫Android客户端
默默生长
4楼2017-06-07 15:03:54
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不知道菜虫

新虫 (正式写手)

还有要用作测序的样品一般用好的试剂盒提

发自小木虫Android客户端
默默生长
5楼2017-06-07 15:04:50
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实验加油

禁言 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

6楼2018-12-17 10:32:17
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