10楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-08 13:32:10
是很贵的....我们有时候不急着用的话 会和销售买那种做了免税的的，那个会便宜一些。
那你看能不能找其他实验室借一点咯...

10楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-08 13:32:10
是很贵的....我们有时候不急着用的话 会和销售买那种做了免税的的，那个会便宜一些。
那你看能不能找其他实验室借一点咯...

13楼: Originally posted by llearn at 2017-06-20 14:34:03
你好，我现在买了新的BP酶，做了两次了。第一次长了但不多，好不容易有一个菌落PCR是阳性结果摇菌酶摇起来，第二次的压根就没长，不知道是什么原因呀，现在不敢再做了，毕竟失败一次就是几百块啊求教啊...

14楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-20 21:58:26
不要有太大压力那，5微升体系用的酶不多，也没有一次几百块的。 我们用的3微升体系，一般是0.6微升BP酶。如果连的片段大于1KB，插入片段200ng左右，载体150ng，酶1微升。虽然斑长得少，但都有阳性。你可以试下...

4楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-07 14:41:41
我们用的也是DH5a呢，然后一般是过夜培养（大概16h）。蛋白酶K不加没问题，我们其实从来没加过。。。每次反应完直接就转化了...

16楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-07-12 09:17:38
请问你们LR表达载体是什么？

14楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-06-20 21:58:26
不要有太大压力那，5微升体系用的酶不多，也没有一次几百块的。 我们用的3微升体系，一般是0.6微升BP酶。如果连的片段大于1KB，插入片段200ng左右，载体150ng，酶1微升。虽然斑长得少，但都有阳性。你可以试下...

19楼: Originally posted by 空白格空白格 at 2017-08-24 20:51:46
你好，我可以请问你一个问题吗？我的目的片段是2.4kb，之前做的都是1 ul 75ng/ul的质粒，1 ul  75ng/ul 的 pdnor201，1ul的BP酶，1ul的超纯水，总共5ul，12h 25度反应，做了5 6次了，一直不长单菌落，是不是浓度太 ...