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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Nathalie

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助:RT-PCR后actin 扩不出来? 已有1人参与

求助:RNA提取后,跑电泳是有三条带的,但是反转后跑PCR扩不出来actin ,请问是什么原因?求指教!!
pcr条件和以前一样,以前用同样的条件是可以扩出来的
ps:只扩出来一个组织的,其他组织的RNA反转后,跑电泳没有actin目的条带
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漫漫123

金虫 (小有名气)

反转录忘加酶或者引物了吧
7楼2017-08-19 14:18:02
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kanqi123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先看电泳有没问题,如果marker没问题,说明电泳没问题。然后就是检查PCR,影响PCR的有引物,模板,酶,退火温度等,既然条件跟以前一样,说明引物和退火温度没问题,那么有问题的可能是酶或者模板,酶的问题只需要看看它进行其他的PCR的时候有没有问题就知道了,然后就是模板了,你的模板是RNA反转的cDNA,RNA没有问题,那么很有可能是反转出了问题。
2楼2017-06-01 09:47:40
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