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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：RT-PCR后actin 扩不出来？
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Nathalie

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助：RT-PCR后actin 扩不出来？ 已有1人参与

求助：RNA提取后，跑电泳是有三条带的，但是反转后跑PCR扩不出来actin ,请问是什么原因？求指教！！
pcr条件和以前一样，以前用同样的条件是可以扩出来的
ps：只扩出来一个组织的，其他组织的RNA反转后，跑电泳没有actin目的条带
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1楼 2017-05-31 21:18:04
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kanqi123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先看电泳有没问题，如果marker没问题，说明电泳没问题。然后就是检查PCR，影响PCR的有引物，模板，酶，退火温度等，既然条件跟以前一样，说明引物和退火温度没问题，那么有问题的可能是酶或者模板，酶的问题只需要看看它进行其他的PCR的时候有没有问题就知道了，然后就是模板了，你的模板是RNA反转的cDNA，RNA没有问题，那么很有可能是反转出了问题。
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2楼2017-06-01 09:47:40
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zeysxw044
3楼2017-08-17 14:31:42
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qmramk42
4楼2017-08-18 10:00:14
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zeysxw044
5楼2017-08-19 02:44:31
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qmramk42
6楼2017-08-19 07:55:47
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漫漫123

金虫 (小有名气)
反转录忘加酶或者引物了吧
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7楼2017-08-19 14:18:02
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qmramk42
8楼2017-08-21 06:17:25
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qmramk42
9楼2017-08-22 09:57:49
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