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PCR 过程中遇到的各种奇怪问题
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问题1：之前设计的引物上游是BamH 1 的酶切位点，以基因组DNA为模板能P出来目的片段，然后发现位点有问题，重新换成了Pst1 的位点，引物的退火温度和GC含量都没有变，然后就P不出来了，但是把模板换成之前构建好的质粒就可以P出来 问题2：PCR产物跑出来有1000bp左右，但是切胶回收之后再进行鉴定发现目的片段到4000bp了 问题3：从基因组上P下来的目的片段能够顺利的连接上T载体，但是从构件好的质粒上P下来额片段就连接不上（做过重复试验）。 这是最近实验遇到的一些特别奇怪的问题 ，希望论坛里的大牛能给解答一下 万分感谢！@biostar2009@wizardfan@youlinglyw |
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