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皮妮1123

新虫 (初入文坛)

[求助] X33电击转化 已有2人参与

大家好,我是做酵母表达的新手,最近用X33与ppiczαA做电击转化,可是板上始终没有菌落生长,因为实验室条件原因我的ppiczαA载体是没有线性化的直接导入X33中。不知道我的制备感受态过程与电击转化条件是否有问题,向各位请教一下!
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钟颖小确幸

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要线性化吧!虽然电转化的效率比化学转化高,但是总体来说,真核的转化效率低啊,没线性化很难整合进去吧
2楼2017-05-03 11:54:33
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631783739

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

需要线性化,可以用Pme1限制性内切酶,37℃酶切两个小时,清洁回收即可
3楼2017-05-09 15:09:39
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