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海燕追梦

新虫 (正式写手)
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菌液pcr
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菌液pcr出不来了，菌液pcr的程序，体系应该注意那些问题呢 ？阳参始终出不来，但是换用其它高保真的酶就能p出来，虽然说不同的酶有不同的程序，之前正常pcrTaq酶能出来的，但是为什么Taq酶放在菌液pcr出不来了，阳参都不出。。。。。。。求大神指点一下。出来讨论一下可以吗？

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1楼 2017-04-30 20:22:11
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海燕追梦

新虫 (正式写手)
引用回帖:
34楼: Originally posted by Sean2010 at 2017-05-01 02:28:06
其实貌似是跟引物的退火温度关系更大些，虽然酶的活性和保真性也会影响（结合到模板和引物上啥的）。
我之前试过Taq酶体系优化。从镁离子开始（缓冲溶液不需要优化，引物浓度如果其他高保真酶p的出来也没必要变，d ...

pcr后，胶上只能看到特别亮的引物二聚体，但是用其他高保真酶，引物二聚体条带就很微弱。我有怀疑退火温度太高。。

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36楼2017-05-01 12:46:47
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pandongzi2楼
2017-04-30 20:22   回复  
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coppelia3楼
2017-04-30 20:22   回复  
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雨花田半亩4楼
2017-04-30 20:22   回复  
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星期天与飞5楼
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152801126楼
2017-04-30 20:22   回复  
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keyanxmc7楼
2017-04-30 20:22   回复  
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氢风kelly8楼
2017-04-30 20:22   回复  
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cffyau9楼
2017-04-30 20:22   回复  
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eiri10楼
2017-04-30 20:23   回复  
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zzp62311楼
2017-04-30 20:23   回复  
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坚持奋斗12楼
2017-04-30 20:23   回复  
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Simon_taller13楼
2017-04-30 20:23   回复  
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alva38614楼
2017-04-30 20:23   回复  
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