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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 退火温度梯度下降是为什么
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18115179716

金虫 (正式写手)

[求助] 退火温度梯度下降是为什么 已有2人参与

有个pcr程序，退火温度68(-1)°C×7cycles,然后退火温度58°×25cycles，为什么刚开始七个循环退火温度要逐步下降?为什么不直接58°32cycles?

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-04-28 15:18:08
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weebug

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在不同温度测试引物的结合度，较低温度理论上有较多pcr产物。
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天蓝蓝兮日头晒
2楼2017-04-28 17:21:43
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longqi_2007

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这是touchdown PCR方法，特异性比一般PCR更好，
很多试剂盒都是用的这种方法，像一些支原体检测试剂盒就是采用的这种方法，具体可以查看炎熙生物的门户网站有说明。
http://www.biothrive.cn/Product/5102865729.html
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3楼2017-04-28 21:38:38
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