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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急急急，求各位帮忙，指出问题
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cifer1230

金虫 (著名写手)

[交流] 急急急，求各位帮忙，指出问题

前两天做的pcr,每个都有引物二聚体，这个怎么消除呀，连我用水做的模板都有引物二聚体，是不是引物加多了。还是我的模板有问题，请求各位牛人帮帮忙。
图中从左往右分别是123我的不同处理；4，6，7是内参，5是marker，8，9是以水为模板，我的目的基因的引物和内参的引物。我怎么优化才能没有引物二聚体，因为刚开始做pcr,也没有师姐教，可能问题比较Low,但是希望大家指教指教，谢谢！！！

急急急，求各位帮忙，指出问题
1.jpg
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1楼 2017-04-27 08:14:00
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cifer1230

金虫 (著名写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by dadaoxing at 2017-05-06 10:17:32
是因为引物本身的问题导致引物二聚体存在，重新设计吧

麻烦问一下，你的退火温度是按设计软件上的Tm值，还是合成报告单上的，这两个还是差很多呢
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33楼2017-06-15 20:56:57
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月白风清@

铜虫 (正式写手)
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
引物浓度大了吧，引物自身也有互补结构

发自小木虫Android客户端
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4楼2017-04-27 08:37:02
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范威21003

铁杆木虫 (小有名气)
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
可以说的具体一点吗？这样也不知道从哪方面分析原因

发自小木虫Android客户端
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5楼2017-04-27 08:37:05
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蓝蓝0921

铁杆木虫 (职业作家)
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
可能是引物出问题:引物互补结构；引物浓度大
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6楼2017-04-27 08:37:32
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江南的竹2楼
2017-04-27 08:20   回复  
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
。。。。。。。。。。。 发自小木虫Android客户端
tanliangzhi3楼
2017-04-27 08:24   回复  
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
, 发自小木虫Android客户端
也是小白7楼
2017-04-27 08:42   回复  
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
？ 发自小木虫Android客户端
xufan11楼
2017-04-27 09:26   回复  
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
朝都12楼
2017-04-27 09:39   回复  
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
好 发自小木虫Android客户端
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