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急急急,求各位帮忙,指出问题
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cifer1230
金虫
(著名写手)
应助: 4
(幼儿园)
金币: 5311.2
帖子: 1680
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虫号: 2093888
[交流]
急急急,求各位帮忙,指出问题
前两天做的pcr,每个都有引物二聚体,这个怎么消除呀,连我用水做的模板都有引物二聚体,是不是引物加多了。还是我的模板有问题,请求各位牛人帮帮忙。
图中从左往右分别是123我的不同处理;4,6,7是内参,5是marker,8,9是以水为模板,我的目的基因的引物和内参的引物。我怎么优化才能没有引物二聚体,因为刚开始做pcr,也没有师姐教,可能问题比较Low,但是希望大家指教指教,谢谢!!!
1.jpg
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1楼
2017-04-27 08:14:00
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稻草人儿
新虫
(小有名气)
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帖子: 59
在线: 9.6小时
虫号: 2988598
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
引物自身互补序列太多了,引物二聚体都会存在,但是你的结果太严重,应该是引物设计问题
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21楼
2017-04-30 19:00:09
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月白风清@
铜虫
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★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
引物浓度大了吧,引物自身也有互补结构
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4楼
2017-04-27 08:37:02
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范威21003
铁杆木虫
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虫号: 3138650
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
可以说的具体一点吗?这样也不知道从哪方面分析原因
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5楼
2017-04-27 08:37:05
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蓝蓝0921
铁杆木虫
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★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
可能是引物出问题:引物互补结构;引物浓度大
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6楼
2017-04-27 08:37:32
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江南的竹
2楼
2017-04-27 08:20
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
。。。。。。。。。。。
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tanliangzhi
3楼
2017-04-27 08:24
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
,
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也是小白
7楼
2017-04-27 08:42
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
?
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xufan
11楼
2017-04-27 09:26
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
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朝都
12楼
2017-04-27 09:39
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cifer1230(金币+1): 谢谢参与
好
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