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Gateway的LR反应后扩增不出条带已有2人参与
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我做的是将E8启动子和目的基因片段通过LR反应连接到表达载体上，但是LR反应后，用E8启动子的引物扩增不出来条带。用的是菌落PCR，吸两百微菌液离心，去离子水重悬，体系是20微升，mastermix10微升，水6微升，引物2微，模版2微。条件是94°C5min，94°C30s，48-55°C梯度30s，72°C2min45s，片段大小为2400bp，30个循环，老是扩增不出条带。但是用目的基因的引物可以阔出小的片段。求问该怎么办啊 发自小木虫IOS客户端 |
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