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XM沐沐

新虫 (小有名气)

[求助] 请教大神们，做了玉米荧光定量PCR，试验曲线如下图，CT值看哪个图？谢谢 已有2人参与

如图曲线，共三组，一组对照，内参使用GAPDH，两组处理组，实验曲线是否有效？另CT值从哪个曲线图看？谢谢

请教大神们，做了玉米荧光定量PCR，试验曲线如下图，CT值看哪个图？谢谢
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请教大神们，做了玉米荧光定量PCR，试验曲线如下图，CT值看哪个图？谢谢-1
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请教大神们，做了玉米荧光定量PCR，试验曲线如下图，CT值看哪个图？谢谢-2
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1楼 2017-04-26 15:45:33
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
XM沐沐(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:34:09
XM沐沐: 金币+7, ★★★很有帮助 2017-05-17 10:55:34
CT值是第一个图看的。。。CT值要引申一个阈值线的概念，阈值线和扩增曲线的交点就是CT值，通常我们的阈值线是自动生成的，也可以手动调整，当阴性扩增凹凸不平时可以手动调整至刚好超过阴性线。2,3图是溶解曲线，主要看3图是否为单峰，峰的温度是否够高，是否与你测试引物时候一致来判断是否合格。
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2楼2017-04-26 16:22:28
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bestzdz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
XM沐沐(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:34:36
熔解曲线没什么问题，Ct值当然是从第一个图看，只是你这第一张图基线附近上下起伏的线是什么，阴性对照么，好像起伏有点大
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学海无涯，乐在其中；谨言慎行，惜时自勉！
3楼2017-04-26 16:30:07
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XM沐沐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bestzdz at 2017-04-26 16:30:07
熔解曲线没什么问题，Ct值当然是从第一个图看，只是你这第一张图基线附近上下起伏的线是什么，阴性对照么，好像起伏有点大

对，内参选用的是GAPDH，是否需要更换？
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4楼2017-05-17 10:56:58
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XM沐沐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-04-26 16:22:28
CT值是第一个图看的。。。CT值要引申一个阈值线的概念，阈值线和扩增曲线的交点就是CT值，通常我们的阈值线是自动生成的，也可以手动调整，当阴性扩增凹凸不平时可以手动调整至刚好超过阴性线。2,3图是溶解曲线，主 ...

内参的CT值在22到24，是跟样本浓度有关，还是需要尝试其他的内参？谢谢
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5楼2017-05-17 10:59:49
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by XM沐沐 at 2017-05-17 10:59:49
内参的CT值在22到24，是跟样本浓度有关，还是需要尝试其他的内参？谢谢...

内参选择是挑选引物，如果是自己设置的就多选几对引物，选CT值低，浓度高，溶解曲线一致性好，单峰的引物做后续实验。
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6楼2017-05-19 08:45:28
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XM沐沐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-05-19 08:45:28
内参选择是挑选引物，如果是自己设置的就多选几对引物，选CT值低，浓度高，溶解曲线一致性好，单峰的引物做后续实验。...

好的，谢谢
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7楼2017-05-19 09:17:45
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Hey Daring

新虫 (正式写手)
网上多搜搜资料吧 很多 而且 你应该用的试剂盒 说明书上都会有常规问题的解答

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8楼2017-05-26 17:21:30
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XM沐沐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Hey Daring at 2017-05-26 17:21:30
网上多搜搜资料吧 很多 而且 你应该用的试剂盒 说明书上都会有常规问题的解答

好的，谢谢
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9楼2017-05-27 09:53:41
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