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XM沐沐

新虫 (小有名气)

[求助] 请教大神们,做了玉米荧光定量PCR,试验曲线如下图,CT值看哪个图?谢谢 已有2人参与

如图曲线,共三组,一组对照,内参使用GAPDH,两组处理组,实验曲线是否有效?另CT值从哪个曲线图看?谢谢

请教大神们,做了玉米荧光定量PCR,试验曲线如下图,CT值看哪个图?谢谢
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请教大神们,做了玉米荧光定量PCR,试验曲线如下图,CT值看哪个图?谢谢-1
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请教大神们,做了玉米荧光定量PCR,试验曲线如下图,CT值看哪个图?谢谢-2
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
XM沐沐(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:34:09
XM沐沐: 金币+7, ★★★很有帮助 2017-05-17 10:55:34
CT值是第一个图看的。。。CT值要引申一个阈值线的概念,阈值线和扩增曲线的交点就是CT值,通常我们的阈值线是自动生成的,也可以手动调整,当阴性扩增凹凸不平时可以手动调整至刚好超过阴性线。2,3图是溶解曲线,主要看3图是否为单峰,峰的温度是否够高,是否与你测试引物时候一致来判断是否合格。
2楼2017-04-26 16:22:28
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bestzdz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
XM沐沐(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:34:36
熔解曲线没什么问题,Ct值当然是从第一个图看,只是你这第一张图基线附近上下起伏的线是什么,阴性对照么,好像起伏有点大
学海无涯,乐在其中;谨言慎行,惜时自勉!
3楼2017-04-26 16:30:07
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XM沐沐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bestzdz at 2017-04-26 16:30:07
熔解曲线没什么问题,Ct值当然是从第一个图看,只是你这第一张图基线附近上下起伏的线是什么,阴性对照么,好像起伏有点大

对,内参选用的是GAPDH,是否需要更换?
4楼2017-05-17 10:56:58
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XM沐沐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-04-26 16:22:28
CT值是第一个图看的。。。CT值要引申一个阈值线的概念,阈值线和扩增曲线的交点就是CT值,通常我们的阈值线是自动生成的,也可以手动调整,当阴性扩增凹凸不平时可以手动调整至刚好超过阴性线。2,3图是溶解曲线,主 ...

内参的CT值在22到24,是跟样本浓度有关,还是需要尝试其他的内参?谢谢
5楼2017-05-17 10:59:49
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by XM沐沐 at 2017-05-17 10:59:49
内参的CT值在22到24,是跟样本浓度有关,还是需要尝试其他的内参?谢谢...

内参选择是挑选引物,如果是自己设置的就多选几对引物,选CT值低,浓度高,溶解曲线一致性好,单峰的引物做后续实验。
6楼2017-05-19 08:45:28
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XM沐沐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-05-19 08:45:28
内参选择是挑选引物,如果是自己设置的就多选几对引物,选CT值低,浓度高,溶解曲线一致性好,单峰的引物做后续实验。...

好的,谢谢
7楼2017-05-19 09:17:45
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Hey Daring

新虫 (正式写手)

网上多搜搜资料吧 很多 而且 你应该用的试剂盒 说明书上都会有常规问题的解答

发自小木虫Android客户端
8楼2017-05-26 17:21:30
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XM沐沐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Hey Daring at 2017-05-26 17:21:30
网上多搜搜资料吧 很多 而且 你应该用的试剂盒 说明书上都会有常规问题的解答

好的,谢谢
9楼2017-05-27 09:53:41
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