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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何区分目标片段和引物二聚体
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芽芽呢

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何区分目标片段和引物二聚体 已有1人参与

目标片段100bp左右，marker是700bp的，但是送测序结果说是二聚体。用手机拍的照片，调了高亮度。烦劳各位大神帮忙看一下。

如何区分目标片段和引物二聚体


如何区分目标片段和引物二聚体-1


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1楼 2017-04-25 07:56:34
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
引物二聚体跑跑就弥散了，提高琼脂糖的浓度，到2.5

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3楼2017-04-25 15:43:41
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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
芽芽呢(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-27 08:59:05
首先，要确定引物二聚体产生的可能和大小，这些在设计引物时候都会有体现。其次，提高胶的浓度，选用适当的marker。最后就是如果克隆出来目的条带应该能够明显的区分开来，引物和模板结合了那么产生的引物二聚体就会很弱。
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想做一位科研好人
4楼2017-04-25 16:30:24
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芽芽呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-04-25 15:43:41
引物二聚体跑跑就弥散了，提高琼脂糖的浓度，到2.5

谢谢，试了一下，效果不错

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5楼2017-04-27 06:02:02
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芽芽呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-04-25 16:30:24
首先，要确定引物二聚体产生的可能和大小，这些在设计引物时候都会有体现。其次，提高胶的浓度，选用适当的marker。最后就是如果克隆出来目的条带应该能够明显的区分开来，引物和模板结合了那么产生的引物二聚体就会 ...

谢谢，谢谢

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6楼2017-04-27 06:02:33
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