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z457634588

木虫 (小有名气)

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专业: 微生物学

[求助] 生物小白有问题请教。已有3人参与

提取组织中微生物DNA,用的试剂盒，用引物pcr扩增以后条带很浅，不足以能够送去测序，请问有什么办法能够提高我的浓度么？pcr产物回收？还是什么？希望有大神指教呀。

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1楼 2017-04-24 17:01:36

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 原海亮 at 2017-04-24 18:52:59
首先不知道你的PCR条件有没有摸索，是否合适，包括你的模板浓度，引物退火温度等，如果你的条带特异性很好，可以通过增加循环数来提高浓度，如果不行，可以尝试增加扩增体系，然后通过过柱浓缩来提高目的基因浓度， ...

同一批提取的基因组DNA，大部分都能够P出来，只是个别几个样品，基因组浓度低，PCR以后条带很浅，我是要送去高通量测序的。现在的状况就是，基因组是有的，就是浓度低，该如何进行下一步，能够让我PCR扩增出来的条带变亮