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爱萌的小天使铁虫 (初入文坛)
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[求助]
这个问题困扰我一个月了,跪求各位知道的虫友帮忙解决,重组质粒双酶切问题 已有2人参与
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目的基因:1600bp 目的载体1:7000bp;目的载体2::9000bp 目的基因和和T载相连,双酶切,没问题,正常,双酶切回收后,和同样双酶切的两个载体相连,转化大肠JM109,菌液PCR正常,提质粒双酶切,出现若干条带,有目的基因,有载体,但是出现很多奇怪的条带,而且几个平行的样都是一致的,载体单独酶切过,没有问题,目的基因之前和其他载体连接 ,没问题。 用的酶切位点是:BamH I,Mlu I BamH I,EcoR I 一句话总结就是,重组质粒双酶切多条带 |
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