【答案】应助回帖

11楼: Originally posted by bestzdz at 2017-04-21 13:35:22
首先要排除cDNA的质量问题，不光用内参，也要用别的引物试验cDNA样本，看能否正常扩增。如果cDNA没问题，要跑胶看看用基因组DNA扩增的片段大小和你的目的片段是否一致，很有可能是你的引物没设计好，没法扩增出目的 ...

12楼: Originally posted by 宁文峰 at 2017-04-24 20:12:40
你的引物不会落在内含子上了吧

10楼: Originally posted by 你太善良 at 2017-04-21 12:16:29
序列哪里来的cdna扩不出来也正常，可能表达量太低。也有可cdna质量太差，找个常用的基因先扩一下，检查下质量怎么样。

14楼: Originally posted by 修香恋 at 2017-04-26 09:26:28
用基因组扩增的时候条带与目的片段大小一致，应该不是非特异...

13楼: Originally posted by 宁文峰 at 2017-04-24 20:13:41
或者rna存在高级结构，，导致你压根就没反转录出来