24小时热门版块排行榜    

查看: 2132  |  回复: 4

好晓峰

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳染色问题,有图 已有3人参与

本科毕业实验,由于是第一次做,结果不行但是找不到问题所在,求各路大神解答
    变性加样缓冲液: 0.5%溴酚蓝,98%去离子甲酰胺,2%甘油,10mM EDTA
    聚丙烯酰胺凝胶染色:固定液:10%无水乙醇 ;氧化液:1%硝酸;染色液:0.2%硝酸银(500ml+200ul甲醛);显色液:3%碳酸钠(500ml+100ul甲醛+100ul硫代硫酸钠)

    电泳时间200V 3.5h;

    不知道是不是电泳时间不够,但我看溴酚蓝都快要到底了才取出来的。marker都跑出来了,其他的看不清楚。

聚丙烯酰胺凝胶电泳染色问题,有图
IMG_20170414_155520.jpg


聚丙烯酰胺凝胶电泳染色问题,有图-1
IMG_20170414_155552.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的protocol不行,换一个。
2楼2017-04-17 10:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好晓峰

新虫 (初入文坛)

在把电流从50mA提升到100mA后,同样的时间出了这张图。是不是还可以把电流稍稍增大,或是时间再延长一些?
聚丙烯酰胺凝胶电泳染色问题,有图-2
IMG_20170417_161526.jpg

3楼2017-04-17 20:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不用固定,用0.1%的硝酸银染色10分钟,然后用1%的氢氧化钠加1%的甲醛显色试下,

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-17 21:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我的是6%的胶,170V电泳1.5-2个小时

发自小木虫Android客户端
5楼2017-04-17 21:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 好晓峰 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +35 医学老男孩 2026-08-13 83/4150 2026-08-17 20:08 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 8/400 2026-08-17 17:26 by angus9576
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见