应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求问我这个引物行么？
121/2返回列表12下一页
查看: 1634  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

病原新手

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求问我这个引物行么？ 已有2人参与

ITSF   TGC TTG GGA TTG GGG ATT GT
ITSR   GCA CTA ATA CAC TAA CGC CG
TM值分别57和53.5   GC%都是50。但是我就是扩不出条带，但是偶尔有，我退火时间60s延伸90 s。用的12.5ul的体系也做过不同模板量的梯度实验，但是就是没条带。引物二聚体很亮

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-04-13 14:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

y雨tak

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-14 07:47:46
F引物最好不要用AT结尾 用GC结尾

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-04-14 00:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

飞翔的吉大人

新虫 (初入文坛)
退火温度多少，什么条件

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-04-13 15:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做个温度梯度试试吧
赞一下 回复此楼
坚持！
4楼2017-04-14 09:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

50%GC的Tm只有53，太假了吧
赞一下 回复此楼
5楼2017-04-17 10:23:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞翔的吉大人 at 2017-04-13 15:35:56
退火温度多少，什么条件

退火温度60度啊，退火60S  72度延伸 90S
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-27 21:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by y雨tak at 2017-04-14 00:43:26
F引物最好不要用AT结尾 用GC结尾

哦哦 ，有的有条带有的没有，是因为这个原因么 ？ GC结尾有什么优点么？ 谢谢
赞一下 回复此楼
7楼2017-04-27 21:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stabilized at 2017-04-14 09:07:14
做个温度梯度试试吧

做了啊， 有时候有有时候还是没有的。55到60都有条带，但是重复做就不好，条带很淡
赞一下 回复此楼
8楼2017-04-27 21:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-04-17 10:23:40
50%GC的Tm只有53，太假了吧

？？哪里假啊，引物合成回来的单子上，就是这样的啊
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-27 21:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流水青苔

木虫 (著名写手)
后面是不是有五个碱基可以结合

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-04-27 21:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 病原新手 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 听说今天filecode变了 +19 布布和一二 2026-08-06 34/1700 2026-08-07 03:13 by 虫友是什么虫
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ANUsWpSnuWQD 2026-08-06 3/150 2026-08-07 02:06 by nSM3ys5fefM3
[基金申请] 基金中了 +6 laoda193707 2026-08-06 6/300 2026-08-06 23:34 by dragonxp
[基金申请] filecode +10 等待解的谜 2026-08-06 14/700 2026-08-06 21:16 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +3 archvillain 2026-08-06 7/350 2026-08-06 21:05 by archvillain
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭