应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求问我这个引物行么？
121/2返回列表12下一页
查看: 1659  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

病原新手

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求问我这个引物行么？ 已有2人参与

ITSF   TGC TTG GGA TTG GGG ATT GT
ITSR   GCA CTA ATA CAC TAA CGC CG
TM值分别57和53.5   GC%都是50。但是我就是扩不出条带，但是偶尔有，我退火时间60s延伸90 s。用的12.5ul的体系也做过不同模板量的梯度实验，但是就是没条带。引物二聚体很亮

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-04-13 14:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

y雨tak

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-14 07:47:46
F引物最好不要用AT结尾 用GC结尾

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-04-14 00:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

飞翔的吉大人

新虫 (初入文坛)
退火温度多少，什么条件

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-04-13 15:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做个温度梯度试试吧
赞一下 回复此楼
坚持！
4楼2017-04-14 09:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

50%GC的Tm只有53，太假了吧
赞一下 回复此楼
5楼2017-04-17 10:23:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞翔的吉大人 at 2017-04-13 15:35:56
退火温度多少，什么条件

退火温度60度啊，退火60S  72度延伸 90S
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-27 21:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by y雨tak at 2017-04-14 00:43:26
F引物最好不要用AT结尾 用GC结尾

哦哦 ，有的有条带有的没有，是因为这个原因么 ？ GC结尾有什么优点么？ 谢谢
赞一下 回复此楼
7楼2017-04-27 21:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stabilized at 2017-04-14 09:07:14
做个温度梯度试试吧

做了啊， 有时候有有时候还是没有的。55到60都有条带，但是重复做就不好，条带很淡
赞一下 回复此楼
8楼2017-04-27 21:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

病原新手

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-04-17 10:23:40
50%GC的Tm只有53，太假了吧

？？哪里假啊，引物合成回来的单子上，就是这样的啊
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-27 21:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流水青苔

木虫 (著名写手)
后面是不是有五个碱基可以结合

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-04-27 21:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 病原新手 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域 +15 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 16/800 2026-08-13 17:45 by mhIP3HAX38ZI
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +5 医学老男孩 2026-08-13 12/600 2026-08-13 17:30 by Tide man
[基金申请] 静等基金结果 +6 gjjjzhong 2026-08-10 19/950 2026-08-13 17:28 by Tide man
[文学芳草园] 阿姨 +3 汪汪锅 2026-08-09 3/150 2026-08-13 16:56 by 410610288
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭