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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Takara(RR047A)逆转录 85℃ 5s后降温为4℃的过程中取出，是否有问题
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chenfa025

新虫 (初入文坛)

[求助] Takara(RR047A)逆转录 85℃ 5s后降温为4℃的过程中取出，是否有问题

各位大侠，小弟在采用Takara(RR047A) 逆转录过程中，由于心急，85℃ 5s完成后在降温为4℃的过程中就把逆转录产物拿出来了，这样对结果会有影响吗?顺便请教一下各位大侠，85℃ 5s完成后降温为4℃这个过程是有什么作用吗？谢谢大家！

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2017-04-11 22:02:38
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爱点缀在冬初

新虫 (小有名气)
Takara(RR047A)逆转录 85℃ 5s后降温为4℃的过程中取出，是否有问题

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chenfa025
3楼2017-04-13 10:38:51
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爱点缀在冬初

新虫 (小有名气)
我们是15s

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2楼2017-04-13 10:38:09
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chenfa025

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱点缀在冬初 at 2017-04-13 10:38:51

谢谢您的回复，我这个条件是用我师姐的，85℃ 5s后，然后大概是降低到60℃左右就按了stop，然后取出后放在-20℃保存，您看这样会有影响吗？谢谢您！

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4楼2017-04-13 18:21:52
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skull123

木虫 (正式写手)
85℃15s只是为了让逆转录酶失活，整个反应结束，反正产物cdna是没啥事情的，如果不放心在85℃再把时间补齐也没啥事
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chenfa025
5楼2017-04-13 18:49:12
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