24小时热门版块排行榜    

查看: 3829  |  回复: 9

perfect1020

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增一直扩不出目的条带 已有1人参与

想要扩一个基因的全长,从转录组中找到了一部分序列,我就想验证一下这个序列,blast显示就是我要的序列,但是根据这段序列设计引物之后,一直扩不出目的条带,不知道是怎么回事,体系是cDNA0.8ul,F/R0.4,MIX5,水3.4,跑过剃度,跑过降落都不能出现目的条带,引物也换了好几对,结果还是没有,请教各位大神啊,跪求!

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是cDNA的问题?做过阳性对照吗?
2楼2017-04-11 21:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

perfect1020

新虫 (初入文坛)

应该不是cDNA的问题,因为师兄也用的是同样的cDNA,他的能跑出条带

发自小木虫Android客户端
3楼2017-04-12 00:34:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

perfect1020

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2017-04-11 21:44:52
会不会是cDNA的问题?做过阳性对照吗?

应该不是cDNA的问题,师兄用同样的cDNA能跑出条带

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-12 00:35:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cf沐晴

新虫 (正式写手)

请问cDNA是通过提RNA后反转录获得的吗?我也想验证一条转录组中的序列但是在纠结要提DNA验证还是提RNA验证。。求大神赐教

发自小木虫Android客户端
5楼2017-07-26 16:26:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

perfect1020

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cf沐晴 at 2017-07-26 16:26:00
请问cDNA是通过提RNA后反转录获得的吗?我也想验证一条转录组中的序列但是在纠结要提DNA验证还是提RNA验证。。求大神赐教

cDNA是提RNA然后反转录得到的

发自小木虫Android客户端
6楼2017-07-27 16:11:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

perfect1020

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cf沐晴 at 2017-07-26 16:26:00
请问cDNA是通过提RNA后反转录获得的吗?我也想验证一条转录组中的序列但是在纠结要提DNA验证还是提RNA验证。。求大神赐教

我觉得应该用cDNA验证

发自小木虫Android客户端
7楼2017-07-27 16:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cf沐晴

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by perfect1020 at 2017-07-27 16:12:46
我觉得应该用cDNA验证
...

谢谢楼主,好人呐

发自小木虫Android客户端
8楼2017-07-28 11:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yumao8510

木虫 (小有名气)

模板可以适当加多点试下

发自小木虫Android客户端
9楼2017-07-31 09:12:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2017-07-31 19:10:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 perfect1020 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-17 14:17 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:05 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:38 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-16 17:27 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-16 15:48 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见