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求助蛋白质电泳问题，谢谢！
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| 我用12%的分离胶做蛋白电泳，为什么溴酚兰跑到下面了，可是蛋白Marker和样品的蛋白带只在胶的上一半分布。请哪位高手指点，非常感谢！ |
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2楼2009-01-02 12:53:00
mwgyanchu
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3楼2009-01-02 17:04:03
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lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~欢迎常来~
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根据我的经验,百分之九十以上,我敢断定是试剂的问题,而且很大可能是分离胶Tirs的问题.(丙烯酰胺的可能性也是有的,但是不大) 对楼上的意见不同,原因如下: 一:有marker,说明不是蛋白变性不充分的问题,再不充分也会有小分子量的蛋白出来. 二:水压没有压好的结果只能是条带跑出来弯曲,而不是跑不出来. 溴酚兰跑出来大约在6KD左右,你之所以出现这种情况是由于Tris分离胶没有配好,导致条带拉不开.再跑下去的话就能拉开,但是问题是,溴酚兰跑出去了,你又不知判断何时该停下来.应该出在分离胶PH的问题上.建议重配分离胶.与前批次分离胶样品做一个对照. |
4楼2009-01-02 22:12:18