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yutong2016

新虫 (初入文坛)

[交流] 本人一名高中教师,有个关于PCR 的问题想向各位大侠求助 已有12人参与

在PCR 中,引物过长或者过短会有什么样的问题,为啥过短会导致引物相连,还有就是为啥GC含量不能太高,可能问题比较简单,可是我的水平不够想了解的透彻些然后讲给学生听,谢谢大家了

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门前清

木虫 (小有名气)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-07 07:41:57
GC问题楼上已解释!引物过长彼此之间会形成二聚体,过短不容易特异性结合~

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6楼2017-04-07 00:04:02
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艰苦温度

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
PCR过程是通过引物与模版的碱基互补配对后实现的。引物太短,特异性结合能力差,容易与其他的位置结合。而引物太长容易形成引物二聚体。而引物的结合主要是通过氢键结合,GC含量高的键能高,不易与模版结合。

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9楼2017-04-07 08:44:32
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New soul

至尊木虫 (文坛精英)

yyyyy

勤思乐创
2楼2017-04-06 22:11:45
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流水青苔

木虫 (著名写手)


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引物短会相连没听过,只知道与模板结合的特异性不好,你可以网上搜索下“设计引物”看看

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4楼2017-04-06 23:39:31
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毛竹0

新虫 (正式写手)


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引物短,特异性差。引物长容易形成二级结构影响识别。gc含量会影响解链的难易程度

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7楼2017-04-07 07:19:15
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普通回帖

songhesonghe

金虫 (小有名气)

我爱生活犹如我恨
3楼2017-04-06 22:23:23
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大东红日

木虫 (正式写手)


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我自己设计引物,好像也回答不了你的问题

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5楼2017-04-07 00:01:23
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王希庆

禁虫 (小有名气)


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8楼2017-04-07 07:55:41
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冬飞离

木虫 (正式写手)


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因为CG之间是三个氢键,所以比例高了,就难以解链
10楼2017-04-07 09:35:05
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