应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr出现目的条带但序列不对是怎么回事
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2843  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ztt279

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] pcr出现目的条带但序列不对是怎么回事

我克隆目的序列，出现了目的条带，胶回收后连接T载体，转化，蓝白斑筛选，出现了白斑和蓝斑，然后菌液pcr，跑电泳后也出现了目的条带大小的前段，送去测序，却发现与目的片段不一致，这是怎么回事？恳请大牛指教

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-02 10:49:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SFC玮子

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
同求？感觉是引物有问题，有大神可以解答么
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-13 17:43:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

江边鸟

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-14 07:50:21
连t载的测序结果看一下有没有测出你的正反引物序列，正反引物区有了，测序没问题。你再送pcr产物测序，产物测序结果正确再连载体。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ztt279
2楼2017-04-02 11:00:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ztt279

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 江边鸟 at 2017-04-02 11:00:14
连t载的测序结果看一下有没有测出你的正反引物序列，正反引物区有了，测序没问题。你再送pcr产物测序，产物测序结果正确再连载体。

看了一下，确实上下游引物是一样的，那我应该从哪一步改进呀？PCR体系吗？还是哪一步？
赞一下 回复此楼
3楼2017-04-02 12:03:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ztt279

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by 江边鸟 at 2017-04-02 11:00:14
连t载的测序结果看一下有没有测出你的正反引物序列，正反引物区有了，测序没问题。你再送pcr产物测序，产物测序结果正确再连载体。

又看了一下，发现只有一条条带均含有上下游引物，其他的条带有的不含有，有的只含有上游或下游引物，而且与目的条带重叠的部分特别乱，要不然在中间，要不然在下游处，这是什么情况呀？
赞一下 回复此楼
4楼2017-04-02 12:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +21 新时代材料 2026-03-27 23/1150 2026-04-01 22:42 by peike
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 10/500 2026-04-01 22:19 by Dyhoer
[考研] 085601材料工程找调剂 +20 oatmealR 2026-03-29 21/1050 2026-04-01 21:00 by lijunpoly
[考研] 284求调剂 +12 小熊～～ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 265求调剂 +11 yelck 2026-04-01 12/600 2026-04-01 19:12 by 549790059
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 336求调剂 +3 kiyy 2026-04-01 3/150 2026-04-01 12:46 by wxiongid
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 0710生物学求调剂！ +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +10 @taotao 2026-03-29 10/500 2026-04-01 09:30 by oooqiao
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +6 笃行致远. 2026-03-28 6/300 2026-04-01 09:28 by oooqiao
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:27 by 求调剂zz
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭