| 查看: 1220 | 回复: 5 | |||
[求助]
签了几天的到、终于派上用场了 已有1人参与
|
从第一次实验到这次实验，参数从未改过、阈值和基线仍是这个鬼样子、想知道具体是怎么回事、可以告诉我吗、protocol是师姐给的、我每一个实验结果看到的阈值都是这样、想知道具体怎么破、谢谢了、下次有金币还会补上   @飞约疯人院 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有133人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求虫友帮我分析一下——遇到无良的单位了
已经有8人回复
- 星空下跳舞的女人—看到后忍不住贴过来大家分享，希望广大女研究生们优雅一生
已经有89人回复
- 共同学习——元宵节的由来与传说
已经有17人回复
- 【讨论】毕业了，先就业还是先择业？（
已经有14人回复
- 【经验分享】申请CSC德国攻读PhD经验：从套磁、面试到签证
已经有14人回复
大头妞妞2楼2017-03-31 21:27:44
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
3楼2017-03-31 22:35:21
4楼2017-04-01 14:09:49
5楼2017-04-01 14:10:51
日光海
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1508.7
- 红花: 1
- 帖子: 87
- 在线: 60.3小时
- 虫号: 2612459
- 注册: 2013-08-23
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
【答案】应助回帖
| 双蒸水和去离子水都可以，关键在于定量pcr中的baseline一般都是默认生成的，是根据所有监测的反应孔中的荧光强度变化按照默认算法自定的一个阈值。这个是可以手动调的，至少我们实验室当时用的LightCycler480是可以自己手动调整以避开背景反应的干扰的。PCR中，即使不加模板，但由于引物之间会有错误配对，即使不配对的情况，单链引物自身亦是超短模板，标准模板不存在情况下，引物自生的配对扩增会更加频繁，因此引物扩增的超短双联DNA也会产生荧光信号（比如普通PCR中的引物二聚体的产生）。所以你就会看到很多非标准S型曲线的扩增荧光曲线，但机器本身识别不了这个，仍会把这个看作是PCR扩增，所自动生成的baseline会把这一部分荧光强度也算进去。具体的，要做很多优化和分析了，引物设计时一定要避免这个，尤其是在高精度的定量中。 |
6楼2017-11-03 13:23:40
100