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周末爱晴天

新虫 (初入文坛)

[求助] 煮样 已有1人参与

跑SDS-PAGE胶为什么要煮样?除了破坏蛋白的空间结构之外,高温不会使我的蛋白样品降解吗?我的样品分子量比较大,有很多降解条带,那么这些降解带有没有可能是煮样造成的呢?很疑惑,求解
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lvchaoAndy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
经过高温处理,其目的是将SDS 与蛋白质充分结合,以使蛋白质完全变性和解聚,并形成棒状结构同时使整个蛋白带上负电荷;SDS 可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,从而只根据分子量大小的不同导致跑胶的速度不同,排除了因空间结构的不同所造成的误差高温同样起到了灭活蛋白酶的作用
2楼2017-03-30 20:35:17
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