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引物验证没有目的条带
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引物验证跑琼脂糖凝胶电泳时目的基因基本上跑不出来，有的很弱，可是内参跑的很亮。引物是用Prime 5设计的，产物长度在80-200bp之间。 反应体系是 模板 1微升 2× Taq PCR Master Mix 12.5微升 上游引物 1微升 下游引物 1微升 ddH2O 9.5微升 总体系 25微升 PCR循环程序是 预热 94℃ 3min 30个循环: 变性 94℃ 30sec 退火 50℃ 30sec 延伸 72℃ 1min 72℃ 5min 4℃ 保温 退火温度之前设置的是55℃，没有跑出来目的条带，就降到50℃了。 下面这张图是按照上面的体系跑出来的 希望各位大神帮忙看看什么问题 谢谢谢谢。。。。  633327464417795294.jpg |
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