24小时热门版块排行榜    

查看: 1753  |  回复: 9

想起旎

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR拖尾 已有1人参与

我在做PCR时出现严重拖尾现象,不知道是怎么回事,请高手指点
? ?我的目的片段大约为700bp,利用的反应体系如下:
94 度,5分钟
94 度? ???30 秒
60 度? ? 30 秒
72??度? ?45 秒? ??
30个循环
72 度7分钟

PCR拖尾


发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

布za

铜虫 (初入文坛)

2楼2017-03-27 19:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌树枯草

新虫 (初入文坛)

加的引物等反应组分太多了吧

发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-27 20:35:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

艰苦温度

新虫 (小有名气)

4楼2017-03-27 23:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

h8w67p

新虫 (初入文坛)

5楼2017-03-28 00:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

姜三胖

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-28 07:44:25
模板浓度过高会导致拖带,进行稀释或少加点模板

发自小木虫Android客户端
6楼2017-03-28 00:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenshuai1238

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-30 22:40:09
可以考虑手动hot-start进行pcr,也就是在体系温度达到98度的时候,再往里面加酶,可以减少很多碎片序列的产生
7楼2017-03-29 11:18:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛神惟惟

新虫 (正式写手)

退火温度升两度,或者多加几个循环

发自小木虫Android客户端
8楼2017-03-29 15:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古格银眼007

铜虫 (初入文坛)

模板质量不好吧
9楼2017-03-30 21:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihopcr

新虫 (初入文坛)

10楼2017-04-05 08:21:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 想起旎 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 12/600 2026-08-12 01:27 by 南京中西医
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见