24小时热门版块排行榜    

查看: 1761  |  回复: 9

想起旎

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR拖尾 已有1人参与

我在做PCR时出现严重拖尾现象,不知道是怎么回事,请高手指点
? ?我的目的片段大约为700bp,利用的反应体系如下:
94 度,5分钟
94 度? ???30 秒
60 度? ? 30 秒
72??度? ?45 秒? ??
30个循环
72 度7分钟

PCR拖尾


发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

布za

铜虫 (初入文坛)

2楼2017-03-27 19:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌树枯草

新虫 (初入文坛)

加的引物等反应组分太多了吧

发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-27 20:35:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

艰苦温度

新虫 (小有名气)

4楼2017-03-27 23:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

h8w67p

新虫 (初入文坛)

5楼2017-03-28 00:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

姜三胖

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-28 07:44:25
模板浓度过高会导致拖带,进行稀释或少加点模板

发自小木虫Android客户端
6楼2017-03-28 00:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenshuai1238

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-30 22:40:09
可以考虑手动hot-start进行pcr,也就是在体系温度达到98度的时候,再往里面加酶,可以减少很多碎片序列的产生
7楼2017-03-29 11:18:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛神惟惟

新虫 (正式写手)

退火温度升两度,或者多加几个循环

发自小木虫Android客户端
8楼2017-03-29 15:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古格银眼007

铜虫 (初入文坛)

模板质量不好吧
9楼2017-03-30 21:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihopcr

新虫 (初入文坛)

10楼2017-04-05 08:21:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 想起旎 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
请填处理意见