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shz506042

金虫 (初入文坛)

[求助] q-PCR结果 已有1人参与

请教各位大神,做q-PCR之前从未遇到这种情况,为什么扩增曲线会呈下降的趋势。

q-PCR结果
00000.jpg


q-PCR结果-1
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许彦

木虫 (正式写手)

5楼2017-03-28 13:22:32
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star013

新虫 (知名作家)


荧光定量原因很多,需要慢慢调整

发自小木虫Android客户端
2楼2017-03-25 11:43:55
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shz506042

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2017-03-25 11:43:55
荧光定量原因很多,需要慢慢调整

比如说?前段时间我做过几批,从未遇到这样的情况。
3楼2017-03-25 17:32:51
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小鱼仙994

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
图1一开始荧光强度就很高,要么是试剂的事,要么是有基因组的污染。在看图二有双峰说明有引物二聚体或者是基因组残留而且你这个峰在前面所以有可能是二聚体,但你说前面做的都挺好的话那就有可能是污染。建议你跑个胶不行的话就换试剂试试。师兄用过一种从细胞直接做到qpcr的试剂盒挺方便的。个人的拙见希望对你有帮助。
救命稻草
4楼2017-03-26 02:18:14
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