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爱吃橘子的sj

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR换高保真酶就打死p不出来正确长度的产物,, 已有2人参与

之前用艾德莱的taq酶优化条件就p出来了,长度也对1200多,换了takara的 primer star  hs高保真酶就打死p出来长度就是2000或者大于两千,或者弥散还有什么都没有,江湖救急啊,给点建议

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爱吃橘子的sj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-03-23 23:26:01
都做出来了。为什么好玩换酶,如果是突变多的话,多筛单克隆就可以解决,实在不行用一般的保真酶试试

因为老师说测序,要用高保真酶

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4楼2017-03-24 13:47:30
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-25 23:00:05
多备几种酶。的确有时候挑酶。我在用toyobo的KOD-FX,蛮强悍的,迄今还没发生过P不出来的情况,突变率很低。推荐。
2楼2017-03-23 20:40:41
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

都做出来了。为什么好玩换酶,如果是突变多的话,多筛单克隆就可以解决,实在不行用一般的保真酶试试

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3楼2017-03-23 23:26:01
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爱吃橘子的sj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-03-23 20:40:41
多备几种酶。的确有时候挑酶。我在用toyobo的KOD-FX,蛮强悍的,迄今还没发生过P不出来的情况,突变率很低。推荐。

我们老师觉得这个应该没有问题,是我操作和条件没有晒好

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5楼2017-03-24 14:50:26
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