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[求助]
怎么设计walking引物
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| 之前没有做过genome walking。现在是想扩增基因的外显子2序列，但是手头上的cDNA序列不太完整，外显子1序列缺失，大概只有50多bp，很难设计上游引物，所以想做walking扩增出内含子1，然后再从内含子1上设计上游引物扩增外显子2。因为手上的序列是cDNA序列，其中外显子2序列长度只有273bp，想问下各位这个长度够不够设计walking的特异性引物，如果可以的话，sp1、sp2和sp3应该如何设计，是否三个特异性引物之间只要避hairpin、dimer、crossdimer就可以了，打算使Takara的genome walking kit ,希望大伙儿可以给点建议~~ |
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