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xiyicui

金虫 (小有名气)

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[交流] 10金币求助——真菌纯化培养操作

各位虫虫好，请帮忙传授一下真菌纯化的具体操作：
比如用什么工具？
怎样操作？
注意什么事项？
纯化几次？
纯化到菌落是什么样的程度，才算纯化？
谢谢：）

[ Last edited by xiyicui on 2008-12-26 at 15:29 ]

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1楼 2008-12-26 11:37:14

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demon507

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★
spadeJ(金币+2,VIP+0):
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-8 12:11

稀释分离法
　　(1)取灭菌培养皿三个，平放在湿纱布上，编号
　　(2)用灭菌吸管吸取灭菌水，在每一皿中分别注入0．5～1．0ml。
　　(3)用移植环蘸一滴孢子悬浮液，与第一个培养皿中的灭菌水混合，再从第一个培养皿移三环到第二个培养皿中，混合后再移三环到第三个培养皿中。
　　(4)将熔化开冷却到45～50C的培养基，分别倒在三个培养皿中(为防止细菌污染，也可以向每个培养皿中事先加入1-2滴25％乳酸)，摇匀，凝固，要使培养基与稀释的菌液充分混匀。
　　提示：倒平板时的培养基温度一定要掌握好，过热易将病原菌烫死而使分离失败，过冷则倒入培养皿中后难以形成平板，而成为起伏不平的表面，不利于分离。为大体估计培养基温度，可将盛培养基的器皿靠在人手背上，如果手背感到烫但尚可以忍耐，则大体为45~50C。
　　(5)将培养皿翻转后置恒温箱(2513)中培养，数日后观察菌落生长情况。
　　挑菌。将培养后长出较为整齐一致的单个菌落分别挑取，接种到斜面培养基上，置25℃左右培养。待菌长出后，检查菌是否单纯，若有其他菌混杂，就要再一次进行分离纯化，直到获得纯株培养
应该有所帮助吧！