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赵晴儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 克基因片段退火怎么55度若克不出来,其他温度是不是也克不出来... 已有7人参与

克基因片段退火怎么55度若克不出来,其他温度是不是也克不出来?

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冰之雪域

新虫 (小有名气)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-17 07:48:54
这个说法肯定不对,PCR受多方面因素的影响。首先可以尝试温度梯度,50-60度。如果不是退火的原因,那就检查下你的基因片段是不是高GC含量的,如果是的话,你可以选择扩增高GC含量的酶和相应的buffer 。

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7楼2017-03-15 22:04:04
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。做梯度。
2楼2017-03-15 11:00:04
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坤啊兽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-17 07:47:40
模板的量做梯度试试,退火温度还可以降到52~54度试试
3楼2017-03-15 15:46:10
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

引物的Tm值是多少?
4楼2017-03-15 15:49:25
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