| 查看: 2393 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
荧光原位杂交FISH镜检计数 已有3人参与
|
|||
|
小妹用荧光原位杂交法，测样品中被荧光标记细菌总数。 1、杂交完后，制作好的载玻片，在普通荧光显微镜下观察就可以还是要激光共聚焦显微镜，有什么区别？如果要看一般放大多少倍合适。 2、镜检的时候怎么计数呢？文献只查到数十几个随机视野，求平均值。怎么把这个结果换算成cell/ml菌液。 3、是否可以用流式细胞计算细菌总数，比载玻片镜检有什么优缺？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有299人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
|
老师我按照这个方法做的，您看对吗？ 1、菌液+4%多聚甲醛固定，过夜 2、离心弃上清液，加0.01Mpbs混悬再离心弃掉上清液，重复一次，重悬0.01Mpbs:乙醇=1:1的溶液，-20度待用。 3、上液取20ul于载玻片，晾干，50%、80%、96%乙醇依次泡3min，晾干。 4、加荧光标记引物5ul和杂交缓冲液（自己配的，含甲酰胺、tris-hcl，nacl，sds），46度恒温箱杂交过夜。 5、杂交完后用清洗液清洗（tris-hcl，nacl，sds，edta，dapi） 6、在冰水里清洗几秒 封片镜检。 是不是清洗不够。老师您如果有时间方便线下加个好友指导下吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2017-03-21 01:15:16
Cells-Qi
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2815.7
- 散金: 100
- 帖子: 222
- 在线: 25.1小时
- 虫号: 4025472
- 注册: 2015-08-17
- 性别: GG
- 专业: 动物遗传学
2楼2017-03-19 10:30:53
|
有木有具体的方法呢？不过别说计数了，今天把做好的片子拿去看了，那边仪器的老师说找不到菌，看到的不知道是菌还是杂质，探针cy3标记的，然后dapi复染，暗视野紫外光只看到很少的几个蓝点，绿光下一片橙红色然后好多一粒一粒的颗粒连成片，不知道是不是菌。我甚至不知道应该是什么样的。第一次做感觉好绝望。也不知道方法对不对。 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-03-20 16:48:37
Cells-Qi
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2815.7
- 散金: 100
- 帖子: 222
- 在线: 25.1小时
- 虫号: 4025472
- 注册: 2015-08-17
- 性别: GG
- 专业: 动物遗传学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-21 07:45:48
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-21 07:45:48
|
连成片可能是浓度太大，稍微稀释一下再做片子！菌的话一般四十倍镜下就能看到啦！ 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-03-21 00:22:14
