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关于肝微粒体提取
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最近在进行肝微粒体提取的研究,虽说这种技术现在已经发展的很成熟,但是初次涉足蛋白提取,感觉总是有点吃力,希望大家多多指教,先谢过啦! 目前肝微粒提取常用的方法有“辅助试剂沉淀法”和“差速离心法”,但是两种方法都涉及一个共同的问题,就是最后离心得到的沉淀不易悬浮(前者离心力27,000g;后者109,000g),特别是差速离心法,沉淀很实,并且最后分散沉淀所用的缓冲液中含有甘油,密度小于上清液,使悬浮变得更加困难。 我用了涡旋机分散,但是涡旋的产热很大,时间久了会有泡沫产生(暗示蛋白变性,超声机更是不敢用),尽管如此,悬浮效果还是很差,不知道各位有没有好的方法,请指点一下,谢谢大家! |
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