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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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宋韬宇

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 走过路过看看分子生物 已有1人参与

请大神帮助,如何解决问题
用的是takara的GXL高保真酶,跑的温度梯度,退火温度是63-66,设计的引物是63和65左右的温度梯度,跑了32个cycle,目的条带是2265,为什么就是扩不出来,谁能给个好建议。

走过路过看看分子生物


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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徐与宋

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

两千多本来就不好扩TM值还那么高就更难了

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5楼2017-03-20 01:25:19
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bbass533

管理员

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-20 06:27:32
本帖内容被屏蔽

2楼2017-03-13 16:56:02
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宋韬宇

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-03-13 16:56:02
高保真酶扩增效率不大好。你前两个孔虽然说扩增出来了但是有降解,后面2个直接就over了。换引物试试,退火温度多摸索几个吧,我一般不用温度梯度,摸索好了就单一温度退火。

嗯,先谢谢你哦。如果引物温度高,但是实际扩出来的需要的温度低有可能吗??

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3楼2017-03-19 21:48:22
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蔓栎天性

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

没有试过这个酶,但是感觉你的模板是不是降解了?

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4楼2017-03-20 00:31:36
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