| 查看: 1758 | 回复: 12 | ||
[求助]
新手做PCR出现问题，请各位大神帮忙解决一下 已有4人参与
|
||
|
用phusion DNA polymerase 做PCR,2kb和1.5kb的片段都没有出来，PCR反应条件： 98℃,30s 98℃,10s 56℃,30s 72℃,1min 72℃,10min 4℃,保存 其中第二步到第四步35个循环 1kb,0.3kb的都有产物，请各位大神帮忙解决一下，谢谢！！！！！ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有124人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 测序结果少了500bp可是PCR结果完全正确
已经有8人回复
- 小鼠基因型鉴定老出问题，目的条带没有跑出来是什么原因
已经有1人回复
- in-fusion连接，农杆菌介导转化真菌，但是第一步做连接时就出问题了
已经有7人回复
- 定量PCR
已经有17人回复
- PCR反应体系改变会导致电泳不出带吗
已经有6人回复
- 求大神指点qPCR结果，相对定量，动物给药后各个个体表达相差数量级，求助~~~~
已经有6人回复
- PCR 克隆 问题，小弟新手，求帮助。
已经有7人回复
- DNA提取质量与DNA模板浓度问题
已经有13人回复
- RT老是做不出来，请各位大戏帮忙指点指点
已经有18人回复
- 关于miRNA靶基因RACE的问题
已经有0人回复
- 新人关于引物设计的问题
已经有0人回复
- 关于RT-pcr中的一些问题
已经有2人回复
- 【原创】原创之七：【图文】系统进化树的构建及编辑【已搜索无重复】
已经有377人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】PCR遇到的问题
已经有0人回复
绝对零度的笑
木虫 (正式写手)
- 应助: 41 (小学生)
- 金币: 3155.8
- 散金: 26
- 红花: 6
- 帖子: 899
- 在线: 95.8小时
- 虫号: 245021
- 注册: 2006-04-22
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-04 22:45:58
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-04 22:45:58
|
Phusion用的Tm值可能跟其他引物不太一样，NEB网上有自动计算Tm值的网站，用他们上面算出的Tm值做做看 另外Phusion酶不要超过2U/50ul反应体系 计算Tm值的网站。或者baidu搜索“NEB Tm Calculator” http://tmcalculator.neb.com/#!/ |
5楼2017-03-04 09:55:24
010308Jing
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3149.2
- 散金: 73
- 红花: 6
- 帖子: 552
- 在线: 125.1小时
- 虫号: 2146845
- 注册: 2012-11-25
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2017-03-04 14:22:01
010308Jing
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3149.2
- 散金: 73
- 红花: 6
- 帖子: 552
- 在线: 125.1小时
- 虫号: 2146845
- 注册: 2012-11-25
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2017-03-04 14:22:39
xinxiyuzhou
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 78 (初中生)
- 金币: 13452.5
- 散金: 55
- 红花: 19
- 帖子: 2045
- 在线: 425小时
- 虫号: 1304974
- 注册: 2011-05-24
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
8楼2017-03-04 16:19:06
小冀-
版主 (著名写手)
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物
2楼2017-03-04 09:14:31
3楼2017-03-04 09:34:53
sky蒲公英
版主 (文坛精英)
- 应助: 177 (高中生)
- 贵宾: 15.664
- 金币: 119295
- 散金: 13465
- 红花: 300
- 沙发: 1428
- 帖子: 19480
- 在线: 5618.4小时
- 虫号: 3384889
- 注册: 2014-08-27
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
- 管辖: 文献求助
4楼2017-03-04 09:36:25
9楼2017-03-04 18:16:59
10楼2017-03-04 18:17:50