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新手做PCR出现问题，请各位大神帮忙解决一下 已有4人参与
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用phusion DNA polymerase 做PCR,2kb和1.5kb的片段都没有出来，PCR反应条件： 98℃,30s 98℃,10s 56℃,30s 72℃,1min 72℃,10min 4℃,保存 其中第二步到第四步35个循环 1kb,0.3kb的都有产物，请各位大神帮忙解决一下，谢谢！！！！！ 发自小木虫Android客户端 |
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Phusion用的Tm值可能跟其他引物不太一样，NEB网上有自动计算Tm值的网站，用他们上面算出的Tm值做做看 另外Phusion酶不要超过2U/50ul反应体系 计算Tm值的网站。或者baidu搜索“NEB Tm Calculator” http://tmcalculator.neb.com/#!/ |
5楼2017-03-04 09:55:24
010308Jing
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