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绿松石6727

新虫 (小有名气)

[求助] 双酶切 已有2人参与

提的蛋白表达载体质粒pet30a,浓度为1200ng/ul,下图为酶切图,中间为对照的没有酶切的质粒,最后一个为marker,对照左右两个酶切,酶为bgl2,和nco1,切质粒2ug,切3个小时,但是全部为涂抹带,问题出在哪里呢?质粒的问题?

双酶切


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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PET30A本来就是低拷贝表达型质粒,你这质粒估计50NG都没有,我一般都是跑六管质粒,把质粒胶回收纯化的只有一条带在酶切的,你这质粒很难酶切,全RNA。
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2017-02-28 16:33:40
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查看全部 8 个回答

mochenmi

铜虫 (小有名气)

你的对照质粒跑出来感觉就有点奇怪,最下面那个条带是什么?

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2楼2017-02-28 00:45:52
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困困的黄瓜

铁虫 (著名写手)

好久没看了~明天再想吧

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3楼2017-02-28 01:09:48
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绿松石6727

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mochenmi at 2017-02-28 00:45:52
你的对照质粒跑出来感觉就有点奇怪,最下面那个条带是什么?

是没有消化的RNA?

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4楼2017-02-28 09:38:03
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