[交流] PCR一直P不出产物，求各位大神一起帮我来找原因？ 已有6人参与

1. 模板是pcDNA3FLAG3-clk，是从其他实验室借来的，没有测序过，但师姐曾成功表达出蛋白。提质粒后，跑胶检测模板是是纯的。   2. 引物设计后找好几个师姐看过，没有问题   3. 阳性对照有条带   4. 模板浓度165ug/ml, 引物浓度25uM   25ul体系：5 X HF          5                      3' Primer        1                      5' Primer        1                      10 X dNTP    1                      Template       0.5                      DMSO           1                      Fusion           0.5                      ddH2O          14.5   5. 目的基因1455bp, 延长时间1分30秒，循环30次[wmv][/wmv]   6. 附件图片 从左至右分别是 PCR sample, PCR sample 2,  postive control,  marker,  template     sample1 和 sample2 反应体系完全相同， 位于PCR 机子的位置不同     postive control 片段大小正确 请求各位大神帮着找找原因啊，做不出来已经快要疯掉了 user 2017-02-06 16hr 53min clk PCR.jpg

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