| 查看: 1082 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
菌液pcr
|
|||
|
现在挑取单菌落，20ul体系，出现模糊的条带，引物二聚体很严重，请问大家怎么能p出条带，避免引物二聚体的出现？引物啊现在已经是0.5ul了 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
|
我的引物浓度10um，用的green. mix酶，做宏基因组文库的筛选，用于p ks片段，最后测序用。但是之前菌夜pcr还是很好的，现在做菌落pcr为什么引物二聚体这么多么？今天老师说菌的数量有些多，是不是这么个道理，还说泡胶时间要长一些？ 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-02-01 11:55:30
2楼2017-01-31 11:13:00
976592787
木虫 (正式写手)
国家自然科学基金委员会委员长
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 2365.1
- 散金: 999
- 红花: 10
- 帖子: 870
- 在线: 179.8小时
- 虫号: 2823824
- 注册: 2013-11-24
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-31 21:35:55
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-31 21:35:55
|
引物浓度多大的，是10uM的吗，该不会是100uM的吧？标准的使用应该是50ul体系用1ul，我们用菌液pcr只使用体系10ul，不知道你用的什么酶，taq还是pfu或者primerstar酶？是什么模板啊，待验证质粒的还是已验证的用来p片段做克隆的啊，你不说清楚怎么给你解决？ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-01-31 20:09:37
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-31 21:36:13
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-31 21:36:13
|
菌沾一下下就行，我做的是青枯，在选择培养基上培养出来的单菌落条带不是很亮，纯培养以后条带很亮，二聚体很少。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-01-31 20:43:05