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凝血酶原时间（PT）测定实验
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实验方法原理 待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子成为X成为Xa。后者使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转变为凝血不溶性纤维蛋白，测定凝固所需时间、即为待测血浆凝血酶时间（PT）、PT测定是外源性系统理想和常用的筛选实验，也可作为外源性途径凝血固定做定量试验，同时也可用于口服抗凝剂治疗的监控。标本的来源与保存： 静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液（1份抗凝液＋9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀。3000rpm（或25O0）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色），标本在不同条件下保存时间如下：－80℃保存，不宜超过3O天，一20℃保存，不宜超过14天，2一8℃保存，不宜超过6小时，22-24℃保存，不宜超过2小时测定。 试剂、试剂盒 PT试剂 实验步骤 1. 试剂重建： 于保存每瓶PT试剂加人2.0ml蒸馏水轻摇溶解．注意：试剂溶解后2－8℃可保存7天，室温（15-25℃）可保存24小时，勿冻结． 2. 手工测定： 取待测血浆（参比血浆）0.1ml．37℃孵育2分钟，加入37℃预温凝血活酶0.2ml；混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为PT值． 3. 血凝仪测定： 请按仪器提供的参数操作 正常值： 1. 以时间表示11-15秒 2. 以PTD表示0.95-1.24 3. 以INR表示0.94-1.30 注意事项 1. 采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管不宜使用普通玻璃管，避免凝血因子活化． 2. 采血时止血带不可束缚过紧并不应超过5分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化． 3. 血液应立即加抗凝剂，血浆制备必须及时，血浆分离应尽快去除血小板血浆分离后应尽快测定。 4. 血浆预温不宜超过10分钟． |
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