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miaomiao1新虫 (小有名气)
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为何我利用CTAB法提取的DNA总是存在RNA污染,RNA酶加特别多也没用,求指点!
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我的具体操作方法是用1ml预热的CTAB溶液(2%)溶解0.1mg大豆粉末样品,65°一小时,后加入10微升RNA酶,37°半小时,离心,取上清加入等体积酚氯仿异戊醇,混合,离心,上清加入等体积氯仿异戊醇,混合,离心,上清加入预冷的异丙醇,离心,70%乙醇洗涤两次。提出的DNA量特别足,加400微升TE,可测得三百多微量/毫升。但260/280普遍在2.1以上,PCR跑胶效果不错,就是260/280这莫高怎么解决?RNA酶量加到50微升依然2.0以上,感觉特别折磨,怎么办?求过来人解答! @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
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charon1982
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-22 07:51:09
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考虑rna酶是否失活了 发自小木虫IOS客户端 |

2楼2017-01-22 07:08:17
miaomiao1
新虫 (小有名气)
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嗯嗯,我又尝试了向提取好的DNA中加入RNA酶,又用氯仿异戊醇抽提了一遍,结果这次的DNA纯度较好,没有RNA污染了,我觉得这样看来RNA酶应该没问题,应该是我操作过程存在问题,也许在无菌工作台中操作会更有保证!还是谢谢你的分析! 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-01-22 20:16:32
4楼2017-01-22 21:13:56
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