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[交流] 关于梯度洗脱

各位朋友，请问
我是个菜鸟
梯度洗脱有些不解，是不是：
比如氯仿：甲醇从10：1-10：5依次洗
是不是每个比例不断洗，直到tlc发现没有新物质出现，然后马上换下一个比例，
用过的硅胶是不是不能再用了。
非常谢谢哦。

1楼 2008-12-12 23:32:00

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银虫 (小有名气)

这个问题根据你所分离的物质的不同是不一样的，有的时候需要每个比例逐个洗脱，但有的时候梯度之间差距过小会使分出的东西交叉过大，导致杂质过多，可以参考文献资料同时多做些预实验来摸索，根据你的需要来选择洗脱系统
用过的硅胶可以再用，不过事先一定要确定处理的很干净，否则会给你的样品中混入不必要的杂质

2楼2008-12-13 22:26:07

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木虫 (小有名气)

你在上样之前应该用合适的梯度跑一个薄层，对主要目标物质之间的极性差距做到心中有数，以指导你在分离过程中加梯度。一般来讲一个梯度跑不多于10个柱体积。多了反而由于纵向扩散造成分离度变差。

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3楼2008-12-14 21:12:02

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