应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请帮我分析一下这个菌液测序结果以及引物设计，谢谢！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2211  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhangdie

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 请帮我分析一下这个菌液测序结果以及引物设计，谢谢！ 已有2人参与

我是做验证cds全长的pcr，全长1143bp，跑出图一条带，直接送去测序没测出我就做了T载体克隆,挑了十个样跑胶如图二(图里二十个样是因为我第一次做连接转化所以pcr分别用我自己的引物和通用引物做了两组)，送检了两个返回结果NCBI比对都分别是两个什么菌的DNA。

我的引物就是cds前二十和后二十四的反向互补，下游cg含量很低退火温度只有不到五十，升高退火温度就不出条带了。

请问这种情况下产物是什么菌的DNA，是我的连接转化操作中有污染还是应该换引物？如果换引物还能怎么设计？请指教谢谢！

请帮我分析一下这个菌液测序结果以及引物设计，谢谢！


请帮我分析一下这个菌液测序结果以及引物设计，谢谢！-1


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-01-09 21:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangdie

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-10 11:12:38
一般是测序错误，应该是质粒的序列，可能是测序公司水平问题。
测序引物应该距离CDS至少50 bp。

NCBI比了一下，两头比上了就是我那个载体，中间比上的是一种菌

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-01-10 16:50:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

MAS_rice

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
还没解决啊

发自小木虫Android客户端
回复此楼
竹杖芒鞋轻胜马，谁怕，一蓑烟雨任平生；回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴
2楼2017-01-10 00:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
设计跨内含子的引物呗。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
3楼2017-01-10 08:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是测序错误，应该是质粒的序列，可能是测序公司水平问题。
测序引物应该距离CDS至少50 bp。
赞一下 回复此楼
4楼2017-01-10 11:12:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +3 一样YWY 2026-04-01 3/150 2026-04-01 10:49 by Jaylen.
[考研] 0710生物学求调剂！ +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 085900土木水利336分求调剂 +3 Zhangjiangj 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:14 by Zhangjiangj
[考研] 333求调剂 +4 阿科逸 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:11 by jp9609
[考研] 材料专业调剂 +4 啦啦啦哭 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:42 by syjjj0321
[考研] 08工科275分求调剂 +8 AaAa7420 2026-03-31 8/400 2026-04-01 08:09 by 探123
[考研] 一志愿：西北大学，英一数一408-284分求调剂 +7 12.27 2026-03-27 7/350 2026-03-31 21:59 by lbsjt
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 求化学调剂 +12 wulanna 2026-03-28 12/600 2026-03-31 16:38 by 690616278
[考研] 生物考研337分求调剂 +4 cgxin 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:18 by 记事本2026
[考研] 一志愿西电085401数一英一299求调剂 六级521 +4 爱吃大鸭梨 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:51 by 搏击518
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 8/400 2026-03-31 08:53 by Qshers
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭