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tlwhssp

新虫 (小有名气)

[交流] 请问做血浆标准曲线的问题

我用的是沉淀蛋白的方法。在两百微升空白血浆中加入10微升储备液,然后加甲醇沉淀蛋白,离心,进样。
想请问一下,药物的血浆浓度的计算,应该就是加入的10微升储备液中含的药物量,除以200微升血浆体积对么,是不是沉淀试剂不参与这个计算过程?另外还想问一下回收率的实验该怎么做?多谢大家了
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shitou0307

木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢提供!
回收率的实验一般有四种方法
最常用的两种方法是:
1.同一浓度的样品6份(取样量减半,然后加入同样量的对照品)
2.同一浓度的样品9份(取样量减半,按取样量的50%、100%、150%的比例各加入定量的对照品)
具体做回收率还有一些具体的要求,再看看工具书什么的,比如回收率的范围、RSD及其他们的表示方法,样品和对照品的处理方法都是有一定的规定的
9楼2008-12-12 09:57:13
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apple1985

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教!
我认为你应该先把你的10微升的储备液先水浴上烘干,然后在往里加200微升的血浆。样品回收率方面的问题 我觉的你先看看能不能出峰,然后在考虑比较妥当
2楼2008-12-11 23:16:41
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apple1985

金虫 (小有名气)

先把你的10微升储备液在水浴上挥干,再加200微升血浆。等出峰了在研究回收率的问题。多看些文献。
3楼2008-12-11 23:19:01
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢指导~! 3Q~!
储备液也可以不挥干 不过真正作实际采的样品时 要加入10微升不含药的空白溶剂补足体积
标曲中药物的浓度=10微升含有的总药量/200微升血浆
回收率=萃取完后复溶的样品浓度/标准溶液(标曲中的药物浓度,即10微升含有的总药量/200微升血浆)
如果是质谱检测还要测基质效应
4楼2008-12-12 08:36:39
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