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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 请问做血浆标准曲线的问题
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tlwhssp

新虫 (小有名气)

[交流] 请问做血浆标准曲线的问题

我用的是沉淀蛋白的方法。在两百微升空白血浆中加入10微升储备液，然后加甲醇沉淀蛋白，离心，进样。
想请问一下，药物的血浆浓度的计算，应该就是加入的10微升储备液中含的药物量，除以200微升血浆体积对么，是不是沉淀试剂不参与这个计算过程？另外还想问一下回收率的实验该怎么做？多谢大家了
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1楼 2008-12-11 20:16:22
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apple1985

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教！
我认为你应该先把你的10微升的储备液先水浴上烘干，然后在往里加200微升的血浆。样品回收率方面的问题 我觉的你先看看能不能出峰，然后在考虑比较妥当
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2楼2008-12-11 23:16:41
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apple1985

金虫 (小有名气)
先把你的10微升储备液在水浴上挥干，再加200微升血浆。等出峰了在研究回收率的问题。多看些文献。
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3楼2008-12-11 23:19:01
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢指导~！ 3Q~！
储备液也可以不挥干 不过真正作实际采的样品时 要加入10微升不含药的空白溶剂补足体积
标曲中药物的浓度=10微升含有的总药量/200微升血浆
回收率=萃取完后复溶的样品浓度/标准溶液（标曲中的药物浓度，即10微升含有的总药量/200微升血浆）
如果是质谱检测还要测基质效应
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4楼2008-12-12 08:36:39
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tlwhssp

新虫 (小有名气)
谢谢楼上各位，因为我用沉淀蛋白的方法，不进行挥干这一步。
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5楼2008-12-12 09:05:01
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风谷

金虫 (小有名气)
你用的是内标还是外标法呀，先做个标准曲线，找个类似的文献参考下。一下不说明白。
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每天都是现场直播
6楼2008-12-12 09:39:57
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longer413

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liuzhaomin at 2008-12-12 08:36:
储备液也可以不挥干 不过真正作实际采的样品时 要加入10微升不含药的空白溶剂补足体积
标曲中药物的浓度=10微升含有的总药量/200微升血浆
回收率=萃取完后复溶的样品浓度/标准溶液（标曲中的药物浓度，即10微 ...

做实际样的时候可以直接取血浆样品210微升，不需要加入10微升不含药的空白溶剂补足体积，，这效果是一样的吧！
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7楼2008-12-12 09:43:06
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longer413

金虫 (小有名气)
楼主应该是内标吧！！！
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8楼2008-12-12 09:44:41
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shitou0307

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢提供！
回收率的实验一般有四种方法
最常用的两种方法是：
1.同一浓度的样品6份（取样量减半，然后加入同样量的对照品）
2.同一浓度的样品9份（取样量减半，按取样量的50%、100%、150%的比例各加入定量的对照品）
具体做回收率还有一些具体的要求，再看看工具书什么的，比如回收率的范围、RSD及其他们的表示方法，样品和对照品的处理方法都是有一定的规定的
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9楼2008-12-12 09:57:13
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tlwhssp

新虫 (小有名气)
没用内标。
标准曲线我已经做好了。
就是其它方法学考察还没有做，我看到有的文献昨方法回收率，是用标准品配一定浓度的血浆样品进样检测，然后把标准曲线上读得的浓度与理论浓度相比即可。不知道这种方法是否可以？因为看书一般都作加样回收率的。
我是新手，有什么说的不清楚不对的地方请多原谅，谢谢
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10楼2008-12-12 13:11:34
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