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卷哥金虫 (小有名气)
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请问大家用过fermentas的快切酶么 ？已有3人参与
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请问大家用过fermentas的快切酶么？就是那个fast digest 酶？我37°C酶切30分钟，用不用终止酶切反应呢？说明书上推荐的是用65° 、10min来终止反应，但此步骤是可选的，大家一般是酶切完直接跑胶还是终止一下酶切反映再跑胶呢？还有就是那个fermentas的双酶切体系要用什么缓冲液怎样找呢？找了官网半天也没见~~~还有就是酶切时用不用在小管里加液体石蜡呢？ 再弱弱的问大家一下 ，用无水醋酸钠（分子量82.03）配置3M （pH=5.0）的溶液咋配呢？百度了一下 都是用三水的醋酸钠配的，但是我们实验室只有无水的，我就麻爪了~~~  还有就是问一下大家引物退火 95°C、 5min ，用不用在小PCR管里加液体石蜡呢？加了石蜡的话，后续试验需用到引物时是不是会有影响呢？ |
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linglingys
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5楼2016-12-23 09:01:09
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-28 07:42:10
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-28 07:42:10
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可以不用终止，酶切完就继续往下做，如果是建库，最好不用快切酶，做一般载体构建快切酶是足够的了 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-12-23 08:54:08
linglingys
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3楼2016-12-23 08:55:51
卷哥
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