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卷哥

金虫 (小有名气)

[求助] 请问大家用过fermentas的快切酶么 ?已有3人参与

请问大家用过fermentas的快切酶么?就是那个fast digest 酶?我37°C酶切30分钟,用不用终止酶切反应呢?说明书上推荐的是用65° 、10min来终止反应,但此步骤是可选的,大家一般是酶切完直接跑胶还是终止一下酶切反映再跑胶呢?还有就是那个fermentas的双酶切体系要用什么缓冲液怎样找呢?找了官网半天也没见~~~还有就是酶切时用不用在小管里加液体石蜡呢?

再弱弱的问大家一下  ,用无水醋酸钠(分子量82.03)配置3M (pH=5.0)的溶液咋配呢?百度了一下 都是用三水的醋酸钠配的,但是我们实验室只有无水的,我就麻爪了~~~

还有就是问一下大家引物退火 95°C、 5min  ,用不用在小PCR管里加液体石蜡呢?加了石蜡的话,后续试验需用到引物时是不是会有影响呢?
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xl8284

新虫 (初入文坛)

没必要终止酶切,直接跑胶切胶
16楼2016-12-26 16:41:27
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