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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » q-pcr的一些问题，求助！！
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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙

[求助] q-pcr的一些问题，求助！！ 已有1人参与

最近开始做q-pcr，感觉好难好绝望。图1是荧光曲线，图2是analysis后的荧光曲线，图3是溶解曲线，看图3引物应该没有问题，关键是曲线太奇怪，出来的Ct值都不能用。我应该怎么优化我的体系呢？请大神指教！

q-pcr的一些问题，求助！！


q-pcr的一些问题，求助！！-1


q-pcr的一些问题，求助！！-2


@wizardfan 发自小木虫Android客户端
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脚踏实地，仰望星空
1楼 2016-12-20 20:51:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wjf7862203

铁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-21 07:37:30
模版浓度太高，在15个循环之前就起峰了，背景也高

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7楼2016-12-21 06:57:29
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浮笙若梦

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
罗氏的机子就是这样，LC96不能调基线，480是可以调基线的，不知道你用的哪个，把基线调小一些试试呢？下次做的时候再稀释一下看看
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8楼2016-12-22 10:12:32
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许彦

木虫 (正式写手)
浓度太高了，稀释一千倍看看，

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9楼2016-12-23 15:24:22
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普通回帖

孔名卓

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2016-12-20 21:11:33
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孔名卓

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2016-12-20 21:12:14
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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孔名卓 at 2016-12-20 21:11:33
引物有问题

对，是罗氏的，引物没有问题吧，溶解曲线里那两条红色的线是水的对照

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脚踏实地，仰望星空
4楼2016-12-20 21:32:33
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wjf7862203

铁虫 (小有名气)
模版浓度太高，15

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5楼2016-12-21 06:55:19
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wjf7862203

铁虫 (小有名气)
模版浓度太高，在15

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6楼2016-12-21 06:56:21
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许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 浮笙若梦 at 2016-12-22 10:12:32
罗氏的机子就是这样，LC96不能调基线，480是可以调基线的，不知道你用的哪个，把基线调小一些试试呢？下次做的时候再稀释一下看看

这个机器是可以LC480 还有960也可以调节的。

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10楼2016-12-23 15:25:06
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